MDT-MD02-01 微生物基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)-研磨管
【预期用途】
微生物基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)用于从革兰氏阳性细菌或真菌等含细胞壁的生物体中分离纯化出高质量、高浓度的基因组DNA。
【检验原理】
在高速振荡情况下,玻璃珠破坏微生物细胞壁。在裂解吸附液和蛋白酶K的作用下微生物基因组DNA与蛋白质分离,在裂解吸附液高盐低pH的环境下,磁珠表面的硅胶高效吸附分离的DNA;洗涤磁珠,去除蛋白、盐等杂质;在洗脱液低盐高pH值的情况下,硅胶释放吸附的DNA,从而达到快速分离纯化基因组DNA的目的。
【试剂盒组成、贮藏及有效期】
产品编号 | 组成成分 | 50T | 100T | 200T |
MDT-MD02-01 | 消化液 | 2mL×1支 | 4mL×1瓶 | 8mL×1瓶 |
研磨管 | 50支 | 100支 | 200支 | |
裂解吸附液D | 10mL×1瓶 | 20mL×1瓶 | 40mL×1瓶 | |
RNA清除剂 | 750μL×1支 | 1.5mL×1支 | 3mL×1支 | |
蛋白酶K | 1mL×1支 | 2mL×1支 | 4mL×1支 | |
RAW1缓冲液 | 12mL×1瓶 | 24mL×1瓶 | 48mL×1瓶 | |
磁珠 | 500µL×1支 | 1mL×1支 | 2mL×1支 | |
洗脱液B | 5mL×1瓶 | 10mL×1瓶 | 20mL×1瓶 | |
使用说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
蛋白酶K:常温(10-30℃)运输,-20℃保存;
消化液\RNA清除剂和磁珠:常温(10-30℃)运输,2-8℃保存;
其他试剂:常温(10-30℃)运输保存。有效期1年。
【注意事项】使用前务必认真阅读以下注意事项
1. 提前配制RAW1,RAW1中乙醇含量低于60%会影响提取效果。
2. 提前配制80%乙醇水溶液,乙醇水溶液中乙醇含量低于80%会影响提取效果。
3. 提前配制消化缓冲液。
4. 磁珠使用前必须充分混匀,磁珠不均匀容易导致磁珠吸取量不准确,从而影响提取效率。
5. 本试剂盒在有效期内不同批号试剂可以互换。
6. 洗脱液使用量太少会影响提取效果。
7. 虽然本产品无氯仿、苯等OSHA规定的危险物品,但操作时最好做好必要的防护措施,戴口罩手套,并且在通风的生物安全柜中进行。
8. 按当地法律法规处理生物样本和废弃物。
【样本要求】
新鲜的痰液、脓液、宫颈粘液、血清、血浆、乳液、粪便、尿液、胸腹水、肺泡灌洗液、脑脊液、组织渗出液、各种拭子(宫颈刷)、培养物等。
【适用范围】
≦2.0×109个细菌;≦5.0×107个真菌
微生物基因组DNA提取试剂盒(研磨法)
一、产品亮点
1. 破壁效果好速度快:对革兰氏阳性菌和真菌的破壁速度快(10分钟内即可完成破壁)、效果好,克服了溶菌/溶壁酶法操作时间长,并且只对部分细菌的细胞壁有效的缺点。
2. DNA完整:迈德泰克研磨法提取的革兰氏阳性菌和真菌的DNA完整。
3. 操作简单快速:独创的快速方法,完成1次提取只需30分钟。
4. 提取环境安全:提取过程无苯酚、氯仿以及OSHA规定的有毒物质,提取环境相对安全。
二、适用范围:≦2.0×109个细菌;≦5.0×107个真菌
三、实验数据
表1 迈德泰克研磨法提取的革兰氏阳性菌DNA与溶菌酶法的比较
革兰氏阳性菌 | 260/280 | 260/230 | 浓度(ng/μL) | |||
研磨法 | 溶菌酶法 | 研磨法 | 溶菌酶法 | 研磨法 | 溶菌酶法 | |
粪肠球菌 | 1.85 | 1.82 | 1.99 | 1.89 | 140.8 | 96.0 |
表皮葡萄球菌 | 1.81 | 1.86 | 1.73 | 1.41 | 140.3 | 30.4 |
头状葡萄球菌 | 1.82 | 1.87 | 1.60 | 1.44 | 74.4 | 28.4 |

图 迈德泰克研磨法和溶菌酶法提取的革兰氏阳性菌DNA的电泳图(上样量2μL)。Lane1-2:研磨法vs溶菌酶法提取的粪肠球菌DNA;Lane3-4: 研磨法vs溶菌酶法提取的表皮葡萄球菌DNA;Lane5-6: 研磨法vs溶菌酶法提取的头状葡萄球菌DNA。



