MDT-TCR01-TZ 组织（细胞）RNA提取试剂盒（Trizol-柱式法）
【预期用途】
组织（细胞）RNA提取试剂盒（Trizol柱式法）用于从组织、培养细胞、革兰氏阴性细菌以及各种体液或拭子细胞中分离纯化总RNA。
【检验原理】
核酸提取缓冲液使蛋白质和RNase变性，促使RNA与蛋白质分离的同时保护RNA不被降解。在酸性条件下，RNA保留在上层水相中，而DNA和蛋白质保留在中间相或下层有机相中。吸取上层水相，在核酸提取缓冲液高盐低pH的环境下，吸附柱内的硅胶膜吸附RNA；洗涤吸附柱，去除蛋白、盐等杂质，在洗脱液作用下，硅胶膜释放RNA，从而达到快速分离纯化RNA的目的。
【试剂盒组成、贮藏及有效期】
产品编号 | 组成成分 | 50T | 100T | 200T |
MDT-TCR01-TZ | 核酸提取缓冲液 | 50mL×1瓶 | 100mL×1瓶 | 100mL×2瓶 |
RAW1缓冲液 | 12mL×1瓶 | 24mL×1瓶 | 48mL×1瓶 | |
吸附柱（含收集管） | 50支 | 100支 | 200支 | |
洗脱液A | 5mL×1瓶 | 10mL×1瓶 | 20mL×1瓶 | |
使用说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
所有成分：常温（10-30℃）运输，阴凉避光保存。有效期1年。
【注意事项】使用前务必认真阅读以下注意事项
1． 提前配制RAW1，RAW1中乙醇含量低于60%会影响提取效率。
2． 提前配制80%乙醇水溶液，乙醇水溶液中乙醇含量低于80%会影响提取效率。
3． 本试剂盒在有效期内不同批号试剂可以互换。
4． 本产品配制和操作过程中涉及苯酚和氯仿等OSHA规定的危险物品，操作时必须做好必要的防护措施，戴口罩手套，并且在通风的生物安全柜中进行。。
5． 按当地法律法规处理生物样本和废弃物。
【样本要求】
新鲜、液氮中保存或组织保存液中保存的组织、细胞以及革兰氏阴性细菌；新鲜的尿液、脓液、胸腹水、肺泡灌洗液、脑脊液、组织渗出液、组织浸出液、等体液以及各种拭子样本。
【适用范围】
≦5.0×106个细胞；≦2.0×109个革兰氏阴性细菌；≦20mg动物组织；≦100mg植物组织。
动物组织/植物组织/细胞（细菌）RNA提取试剂盒（柱式法）
一、产品亮点
1. 提取快速安全：独创的安全快速方法，提取过程无需苯酚、氯仿以及OSHA规定的有毒物质，提取环境相对安全；完成1个提取过程仅需20分钟。
2. 适用样本范围广：适用于革兰氏阴性细菌、培养细胞、各种动物组织和植物组织。
3. RNA完整性好：RNA的完整系数（RIN）≧7，28SrRNA/18SrRNA≧1。
4. 提取效率高：10mg高丰度的动物组织平均可获得50μg左右的RNA，80mg嫩叶或种子可获得50-70μg左右的RNA，3.0×106的培养细胞平均可获得90μg左右的RNA。
5. 纯度高：260/230在2.0左右，260/280在2.0左右，可直接用于酶切、PCR、分子杂交等各种分子生物学实验。
二、适用范围：≦5.0×106个细胞；≦2.0×109个革兰氏阴性细菌；≦20mg动物组织；≦100mg植物组织。
三、实验数据
图1 
图2 
图3
图4
图1迈德泰克组织（细胞）RNA提取试剂盒（柱式法）与Trizol柱式法提取3×106个肺癌上皮细胞RNA（稀释10倍后3μL上样）的电泳结果。Lane1-2：Trizol法提取的RNA电泳图；Lane3-6：迈德泰克提取的RNA电泳图；Trizol法和迈德泰克方法提取的平均浓度为586.75vs 607.18 ng/μL×100μL。
图2迈德泰克组织（细胞）RNA提取试剂盒（柱式法）与Trizol柱式法提取组织RNA的电泳结果。Lane1,3,5：迈德泰克方法提取的RNA；Lane2,4,6：Trizol法提取的RNA。Lane1-2：肝组织（5mg）样本，提取浓度为526.4vs 509.6 ng/μL×100μL（稀释10倍后6μL上样）；Lane3-4：肌肉组织（10mg）样本，提取浓度为33.3 vs 34.3 ng/μL×50μL（6μL上样）；Lane5-6：脾组织（5mg）样本，提取浓度为744.1vs 747.8ng/μL×100μL（稀释20倍后5μL上样）。
图3迈德泰克植物组织RNA提取试剂盒（柱式法）提取植物RNA的电泳结果（稀释10倍后4μL上样）。Lane1-2：80mg嫩叶（779.4ng/μL×100μL，稀释20倍后4μL上样）；Lane3-4：80mg种子（515.3ng/μL×100μL，稀释20倍后4μL上样）；Lane5-6：100mg根茎（336.5ng/μL×100μL，稀释20倍后4μL上样）。
图4迈德泰克细胞（细菌）RNA提取试剂盒（柱式法）提取的细菌和痰液标本中RNA的电泳结果。Lane1-2：革兰氏阴性细菌（大肠杆菌）（173.2ng/μL×100μL，稀释10倍后5μL上样）； Lane3-4：液化后1mL痰液中的细胞沉淀（28.3ng/μL×50μL， 5μL上样）。
表1 迈德泰克 RNA提取产品与Trizol方法的比较
方法 | 适用样本 | 苯酚 | 氯仿 | 提取介质 | 操作复杂程度 | RNA完整性 | 提取效率 | DNA残留 | |
Trizol | 沉淀法 | 各种类型 | √ | √ | 无 | 复杂 | 易降解 | 较低 | 几乎无 |
柱式法 | 各种类型 | √ | √ | 吸附柱 | 较复杂 | 完整 | 高 | 几乎无 | |
迈德泰克方法 | 柱式法 | 各种类型 | × | × | 吸附柱 | 简单 | 完整 | 高 | 几乎无 |
手工磁珠法 | 各种类型 | × | × | 磁珠 | 相对简单 | 完整 | 高 | 少量 | |
自动磁珠法 | 各种类型 | × | × | 磁珠 | 自动 | 完整 | 高 | 少量 | |
