【预期用途】

RNA纯化试剂盒用于从核酸混合物中纯化RNA，RNA片段总回收率大于80%。

【检验原理】

中和缓冲液清除DNA，RNA被吸附柱内的硅胶膜高效吸附，洗涤吸附柱，去除蛋白、盐等杂质。在洗脱液低盐高pH值的情况下，硅胶膜释放吸附的RNA从而获得高质量的RNA。

【试剂盒组成、贮藏及有效期】

所有成分：常温（10-30℃）运输保存，有效期1年。

【注意事项】使用前务必认真阅读以下注意事项

1．提前配制RAW1，RAW1中乙醇含量低于60%会影响提取效果。

2．提前配制80%乙醇水溶液，乙醇水溶液中乙醇含量低于80%会影响洗涤效果。

3．本试剂盒在有效期内不同批号试剂可以互换。

4．虽然本产品无氯仿、苯等OSHA规定的危险物品，但操作时最好做好必要的防护措施，带口罩手套，并且在通风的生物安全柜中进行。

5．按当地法律法规处理生物样本和废弃物。

【样本要求】

≦100μL的核酸混合物。

【自备器械和试剂】

小型高速离心机（最大离心力≥12,000×g）、1.5mL离心管、无水乙醇和异丙醇等。

l  RAW1配制：RAW1缓冲液使用前按照瓶身标签说明加入相应量的无水乙醇，使乙醇含量为60%，混匀后密封常温保存。

l  80%乙醇水溶液配制：1份水加入4份无水乙醇，配制成80%乙醇水溶液，混匀后密封常温保存。

【标准操作步骤】

1．在1.5mL离心管中加入≦100μL的核酸产物和相应体积的洗脱液A，使总体积达到400μL，混匀。

2．加入150µL的中和缓冲液M和250µL异丙醇，充分吹打混匀。

3．将吸附柱放入收集管中，转移所有液体至吸附柱。闭盖12,000×g离心1分钟。吸弃废液，将吸附柱重新放入收集管中。

4．开盖，在吸附柱中加入600μL RAW1，闭盖12,000×g离心20秒。吸弃废液，将吸附柱重新放入收集管中。

Ø加入RAW1时，避免RAW1接触吸附柱的管口。

5．开盖，在吸附柱中加入600μL 80%乙醇水溶液，闭盖12,000×g离心20秒。吸弃废液，将吸附柱重新放入收集管中。

6．开盖，在吸附柱中加入600μL 80%乙醇水溶液，闭盖12,000×g离心20秒。取出吸附柱，丢弃收集管。

7．闭盖12,000×g离心3分钟。取出吸附柱，丢弃离心管。

8．将吸附柱放入新的1.5mL离心管中，加入50µL洗脱液A至吸附柱中心。闭盖室温静置1分钟，12,000×g离心1分钟，收集洗脱液，备用。

Ø洗脱液A的使用量可以根据需要调整，但用量不得低于30µL。

Ø洗脱液的使用量太少会影响提取效果。